肠出血性大肠杆菌O:H7是肠出血性大肠杆菌（EHEC）的一个血清型，主要引起人的食源性疾病，以突发性腹痛、腹泻、血便为主要症状，严重时并发肾衰竭，病死率较高。
作者：浩然
来源：医学界感染频道
肠出血性大肠杆菌O:H7是肠出血性大肠杆菌（EHEC）的一个血清型，主要引起人的食源性疾病，以突发性腹痛、腹泻、血便为主要症状，严重时并发肾衰竭，病死率较高。本文简单介绍了致病大肠杆菌O:H7的检测方法，主要包括常规方法、免疫学方法、PCR方法等，以期对相关检验检疫人员提供参考和借鉴意义。
图1：肠出血性大肠杆菌
（1）细菌分离培养法
常规使用山梨醇麦康凯琼脂培养基（SMAC）对肠出血性大肠杆菌菌株进行分离和筛选，在正常条件下，EHECO:H7不能发酵山梨醇，在SMAC琼脂上呈为无色或者灰色菌落，而其他大肠杆菌则呈红色菌落。此种方法虽然简单、直观并且费用低，但是其敏感性、特异性不很理想。
（2）免疫学方法
1：酶联免疫吸附法（ELISA）
酶联免疫技术的应用，大大提高了检测的敏感性和特异性，现已广泛地应用于O:H7等病原微生物的检验。该方法通过抗原抗体的特异性结合反应，再通过酶标二抗进行结合并显色，可以对所检测物质进行定性和定量。
2：胶体金免疫技术
免疫胶体金法是以胶体金作为标记物应用于抗原抗体的一种新型的免疫标记技术。可分为斑点免疫层析法（DICA）和斑点金免疫渗滤法（DIGFA）两种。
3：纳米免疫磁珠技术
纳米免疫磁珠技术是以抗体包被纳米磁珠的为载体，通过抗体与反应介质中特异性抗原结合，形成抗原－抗体复合物，此复合物在外加磁场的作用下发生定向
移动，从而达到分离目的。有研究报道该方法可在1h内完成菌体的分离和检测，检测限为10CFU/ml。
（3）分子生物学方法
1：DNA探针
目前已制备出可特异性杂交检测的毒性质粒、hly、sltl（VT1）、slt2（VT2）和eae等基因探针。
图2：DNA探针技术
2：PCR技术
PCR是最常用的检测大肠杆菌O:H7致病基因的方法。目前，已从单一PCR发展到多重PCR乃至实时定量PCR。近年来，随着实时定量PCR的发展，这种技术也被用于大肠杆菌O:H7的检测。
3：限制性片段长度多态性（RELP）
限制性片段长度多态性是目前细菌亚分类最常用的方法之一，该法也被成功用于大肠杆菌O:H7的多态性分析。
（4）其他方法
1：基因芯片技术
基因芯片技术又称为DNA芯片技术，是近年来分子生物学及医学诊断技术的重要进展。与普通凝胶电泳法相比该方法检测大肠杆菌O:H7的灵敏度提高了约30倍。
2：生物传感技术
生物传感器是将生物芯片和传感技术结合在一起的产物，该方法灵敏、重复性好，特异性也较为理想。
参考资料：
1：金伯泉。细胞和分子免疫学实验技术[M]。西安：第四军医大学出版社，1-18.
2：LiY,FreyE,MackenzieAM,etal.HumanresponsetoEscherichiacoliO:H7infection:antibodiestosecretedvirulencefactrs.InfectImmun,,68（9）：-.
3：孟祥升等。肠出血性大肠杆菌O:H7检测方法综述。《科技与推广》。
当前时间： 
E-Mail: