丁酸梭菌（康宝）抑菌实验报告

丁酸梭菌（康宝）抑菌实验报告

丁酸梭菌，又名酪酸梭菌，丁酸梭状芽孢杆菌，是一种专性厌氧的革兰氏阳性芽孢杆菌。丁酸梭菌代谢产物的突出特点就是丁酸、B族维生素和叶酸含量高。大量研究表明，丁酸梭菌具有极强的整肠作用，它能够通过抑制致病菌的生长繁殖从而调理肠道的微生态平衡，预防和医治腹泻、肠炎等疾病。

1实验材料

共培养用液体培养基；LB培养基

2实验方法

2.1丁酸梭菌对霍乱沙门氏菌的抑制作用

①霍乱沙门氏菌种子培养：取平板活化好的菌种转接到LB液体三角瓶中，装液量25mL/mL，37℃，r/min培养h，取培养菌液测活菌数和pH值。

②丁酸梭菌单独培养：取丁酸梭菌菌粉0.1g接种到装量为25mL/30mL的细菌培养瓶中，置于37℃静止恒温培养24h左右。（可按此比例扩大培养体积，最低比例为0.1g：25mL）

③丁酸梭菌和霍乱沙门氏菌混合培养：活化好的丁酸梭菌培养液5mL接种到装液量为20mL/30mL的细菌培养瓶中，再把培养好的霍乱沙门氏菌菌液1mL同时接入该共培养液中，37℃恒温静止培养。对比组为向一样的共培养液体培养基中（装液量为20mL/30mL）接种霍乱沙门氏菌菌液1mL，37℃恒温静止培养。分别在16和24h测pH值及沙门氏菌活菌数。

④计数采取平板涂布法。选择2～3个适合梯度稀释液，吸取μL涂布平板，倒置于严格厌氧培养箱或严格厌氧培养袋中，37℃培养18～36h后计数。每一个梯度做两个平行，每一个平板的菌落数在30～范围内有效。

2.2丁酸梭菌对肠出血性大肠杆菌、魏氏梭菌的抑制作用

实验方法同上，魏氏梭菌种子液为严格厌氧，应采取共培养液体培养基。

3实验结果

3.1对霍乱沙门氏菌的抑制结果

丁酸梭菌对霍乱沙门氏菌表现出非常强的抑制作用，24h活菌数从单独培养时2.0×CFU·mL-1减少到1.2×CFU·mL-1。

3.2对肠出血性大肠杆菌的抑制结果

混合培养16h，肠出血性大肠杆菌活菌数从单独培养时3.5×CFU·mL-1减少到7×CFU·mL-1，24h活菌数减少到0.4×CFU·mL-1，pH从6.8下降至4.6，出现良好抑制作用。

3.3对魏氏梭菌的抑制作用

混合培养后，魏氏梭菌活菌数从单独培养时的1×CFU·mL-1减少到1×CFU·mL-1，pH值从6.8下降到4.5，表现出良好的抑制作用。

4小结

丁酸梭菌对霍乱沙门氏菌、肠出血性大肠杆菌和魏氏梭菌均有显著的抑制作用，可将肠出血性大肠杆菌和魏氏梭菌细菌含量控制在病发浓度之下，避免病发。尤其是对霍乱沙门氏菌抑制作用更强，可以到达净化霍乱沙门氏菌的作用。

5、结论

丁酸梭菌在体内的定植产生大量的丁酸、乙酸、乳酸等短链脂肪酸，和B族维生素、叶酸和一些消化酶类，增进肠道内有益菌群如双歧杆菌等乳酸菌的增殖，抑制魏氏梭菌、肠出血性大肠杆菌、沙门氏菌等致病菌的繁殖，减少氨、胺、吲哚等肠道毒素的产生及对肠粘膜的毒害，使肠道内水份潴留明显减少，进而避免了其所致使各种肠道疾病的产生（坏死性肠炎、结肠炎、回肠炎等），恢复肠免疫功能和正常的生理功能，到达无病防病、有病治病的作用。